Coomassie staining
Coomassie staining is a technique used to visualize all proteins in a polyacrylamide gel, generally applied after SDS-PAGE.
Description
Video without interactions as used in H5P: download link (mp4).
Linear video: YouTube link and download link (mp4).
The script that has been used to create the video shown above can be downloaded as excel script file.
| 1 | Verwijder de gel uit het frame en haal de twee glazen platen voorzichtig uit elkaar. |
| 2 | Giet de Coomassie-oplossing (~ 25 ml) in een plastic bakje (met deksel), laat de gel voorzichtig in de oplossing glijden en incubeer 30 minuten op een schudplaat. |
| 3 | Verwijder de Coomassie-oplossing. |
| 4 | Plaats de gel in de ontkleur-oplossing (ca. 25 ml) en incubeer voor minimaal 1 uur op een schudplaat. Ververs vervolgens deze oplossing en incubeer als nodig nogmaals een uur. |
| 5 | Plaats de gel in een bakje met water. |
| 6 | Maak foto van de gel met behulp van de gel scanner (vraag de assistenten). |
| 7 | Reinigen: Spoel glaswerk en gebruikte materialen met H2O en alcohol. Gooi de gel in de afvalbak. |
Download zip to import in LabBuddy.
Welke grootte moeten de eiwitten in de ladder hebben? Vul in: ____ tot ____ kDa
Waar zorgt de SDS-buffer voor in een eiwitoplossing?
- Stabiliseren van de H-bruggen in de tertiaire structuur van een eiwit.
- Dat klopt niet. We scheiden de eiwitten op basis van grootte door ze een negatieve lading te geven. Daarvoor moeten de eiwitten eerst gedenatureerd worden en juist niet gestabiliseerd.
- Correct = no
- Stabiliseren van de waterstofbruggen en zwavelbruggen in de tertiaire structuur.
- Dat is niet correct. De sterke zwavelbruggen wil je juist afbreken om de eiwit te denatureren.
- Correct = no
- Verbreken van de H-bruggen in de tertiaire structuur van een eiwit resulterend in eiwit denaturatie.
- Dat is bijna correct! De H-bruggen alleen zijn niet voldoende om de eiwitten te denatureren, er is een sterkere verbinding aanwezig die ook verbroken moet worden.
- Correct = no
- Verbreken van de waterstofbruggen en zwavelbruggen in de tertiaire structuur resulterend in eiwit denaturatie.
- Goedzo!
- Correct = yes
Please make sure that your product exists and valid for this course
- Skill levelIntroduction video
- CategoryBiochemistry
